Background
Testicular torsion is an acute urological emergency that can cause irreversible injury via ischemia–reperfusion. This study aimed to compare biochemical, histopathological, and immunohistochemical effects of ozone and platelet-rich plasma (PRP) with an untreated ischemia–reperfusion group in a rat model.
Methods
Thirty-two adult male Wistar Albino rats were randomized into four groups: Group 1 (Sham), Group 2 (Ischemia-reperfusion; IR), Group 3 (IR + ozone), and Group 4 (IR + PRP). A 720° unilateral testicular torsion was applied for 1 hour, and reperfusion was achieved by detorsion for 4 hours. Ozone or PRP was administered intratesticularly at the 30th minute of torsion. Biochemical analyses included total antioxidant status (TAS), total oxidant status (TOS), oxidative stress index (OSI), total sulfhydryl groups (T-SH), and malondialdehyde (MDA). Histopathological evaluation was conducted using Johnsen and Cosentino’s scoring systems, and immunohistochemical assessment of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) was performed using the H-score method. Non-parametric statistical tests were used.
Results
Biochemical analyses showed no significant differences among the groups for TAS, TOS, OSI, or MDA, although Group 4 exhibited slightly lower oxidative stress values than Group 3. T-SH levels differed significantly among the groups (p = 0.009). Histopathologically, both treatment groups (Groups 3 and 4) demonstrated improvement compared with Group 2, which exhibited the most pronounced tissue injury. Preservation of seminiferous tubular architecture and reduction in congestion, degeneration, hemorrhage, and necrosis were more evident in Group 4, though not consistently significant. Johnsen scoring showed that Group 4 had significantly higher scores than Group 2 and Group 3 (p = 0.039 and p = 0.036, respectively), indicating better acute preservation of seminiferous tubular architecture and germ cell organization. Cosentino’s scoring demonstrated that Group 4 had significantly lower tubular injury than both Group 2 and Group 3 (p = 0.002 and p = 0.001, respectively). Immunohistochemically, both Groups 3 and 4 exhibited significantly lower eNOS H-scores than Group 2 (p = 0.005), with a numerically greater reduction observed in Group 4, although not statistically significant compared with Group 3 (p = 0.222).
Conclusions
While both ozone and PRP were associated with improvements in testicular tissue after ischemia–reperfusion injury, PRP demonstrated more favorable histopathological and immunohistochemical findings. In contrast, biochemical parameters (TAS, TOS, OSI, and MDA) did not differ significantly among groups, except for T-SH. Therefore, the relative advantage of PRP is mainly supported by histopathological outcomes, and further long-term functional and biochemical studies are needed.

Keywords: testicular torsion, platelet-rich plasma, ozone therapy, ischemia-reperfusion injury

Ratlarda Tek Taraflı Testis Torsiyonu Modelinde İskemi Reperfüzyon Hasarında Ozon Ve Trombositten Zengin Plazmanın (PRP) Etkinliğinin Biyokimyasal Ve Histopatolojik Olarak Karşılaştırılması

Arka Plan
Testis torsiyonu, iskemi-reperfüzyon yoluyla geri dönüşümsüz hasara neden olabilen akut bir ürolojik acil durumdur. Bu çalışma, sıçan modelinde ozon ve trombosit açısından zengin plazma (PRP) ile tedavi edilmemiş iskemi-reperfüzyon grubunun biyokimyasal, histopatolojik ve immünohistokimyasal etkilerini karşılaştırmayı amaçlamıştır.
Yöntem
Otuz iki erişkin erkek Wistar Albino sıçanı dört gruba randomize edilmiştir: Grup 1 (Sham), Grup 2 (İskemi-reperfüzyon; IR), Grup 3 (IR + ozon) ve Grup 4 (IR + PRP). Tek taraflı 720° testiküler torsiyon 1 saat süreyle uygulanmış, reperfüzyon 4 saat boyunca detorsiyon ile sağlanmıştır. Ozon veya PRP, torsiyonun 30. dakikasında intratestiküler olarak uygulanmıştır. Biyokimyasal analizler; toplam antioksidan düzeyi (TAS), toplam oksidan düzeyi (TOS), oksidatif stres indeksi (OSI), toplam sülfhidril grupları (T-SH) ve malondialdehit (MDA) parametrelerini içermiştir. Histopatolojik değerlendirme Johnsen ve Cosentino skorlamaları ile yapılmış; immünohistokimyasal olarak endotelyal nitrik oksit sentaz (eNOS) H-skor yöntemiyle analiz edilmiştir. İstatistiksel değerlendirmelerde parametrik olmayan testler kullanılmıştır.
Bulgular
Biyokimyasal analizlerde TAS, TOS, OSI ve MDA açısından gruplar arasında anlamlı bir fark saptanmamıştır; ancak Grup 4’ün oksidatif stres düzeylerinin Grup 3’e kıyasla hafifçe daha düşük olduğu gözlenmiştir. T-SH düzeyleri gruplar arasında anlamlı farklılık göstermiştir (p = 0.009). Histopatolojik olarak her iki tedavi grubu (Grup 3 ve Grup 4), en belirgin doku hasarının izlendiği Grup 2’ye göre iyileşme göstermiştir. Seminifer tübül mimarisinin korunması ile konjesyon, dejenerasyon, hemoraji ve nekrozun azalması Grup 4’te daha belirgin olmakla birlikte bu farklar her zaman istatistiksel anlamlılığa ulaşmamıştır. Johnsen skorlama sonuçlarına göre Grup 4’ün skorları, Grup 2 ve Grup 3’e kıyasla anlamlı derecede daha yüksek bulunmuş (sırasıyla p = 0,039 ve p = 0,036) olup bu durum seminifer tübül mimarisinin ve germ hücre organizasyonunun akut dönemde daha iyi korunduğunu göstermektedir. Cosentino skorlaması, Grup 4’teki tübüler hasarın hem Grup 2’ye hem de Grup 3’e göre anlamlı derecede daha düşük olduğunu göstermiştir (p = 0.002 ve p = 0.001). İmmünohistokimyasal incelemede, her iki tedavi grubunda eNOS H-skorları Grup 2’ye göre anlamlı derecede düşük bulunmuş (p = 0.005); bu azalma Grup 4’te daha belirgin olmakla birlikte Grup 3’e göre istatistiksel olarak anlamlı değildir (p = 0.222).
Sonuçlar
Hem ozon hem de PRP, iskemi-reperfüzyon hasarı sonrası testis dokusunda iyileşmelerle ilişkiliyken, PRP daha olumlu histopatolojik ve immünohistokimyasal bulgular sergilemiştir. Buna karşın, biyokimyasal parametreler (TAS, TOS, OSI ve MDA) T-SH hariç gruplar arasında önemli bir fark göstermemiştir. Bu nedenle, PRP'nin göreceli avantajı esas olarak histopatolojik sonuçlarla desteklenmektedir ve daha uzun vadeli fonksiyonel ve biyokimyasal çalışmaların yapılması gerekmektedir.

Anahtar Kelimeler: testis torsiyonu, trombosit açısından zengin plazma, ozon tedavisi, iskemi-reperfüzyon hasarı